Biotin-LC-PEG4-NHS ester是一種高效的生物素化試劑，以下是對其的詳細(xì)介紹：

一、化學(xué)結(jié)構(gòu)

• 生物素（Biotin）：作為標(biāo)記基團(tuán)，能夠與親和素（Avidin）或鏈霉親和素（Streptavidin）結(jié)合，實現(xiàn)高親和力檢測與純化。

• 四聚乙二醇鏈（PEG4）：作為間隔臂，提供四個乙二醇單元的長度，減少生物素與目標(biāo)分子間的空間位阻，優(yōu)化標(biāo)記效率。同時，PEG鏈增強試劑的水溶性和穩(wěn)定性，降低免疫原性。

• N-羥基琥珀酰亞胺酯（NHS ester）：作為活性基團(tuán)，在溫和條件下（pH 7.0-9.0）與伯胺基團(tuán)（-NH?）反應(yīng)，形成穩(wěn)定酰胺鍵。

結(jié)構(gòu)式：

二、物理性質(zhì)

• 外觀：白色至灰白色粉末或蠟狀固體。

• 分子量：約588.67-588.68 g/mol。

• 分子式：C??H??N?O??S。

• 溶解性：溶于水、DMSO、DMF等有機溶劑。

• 穩(wěn)定性：需在-20℃下密封保存，避免光照和潮濕，以防止降解。

三、功能特性

• 高效標(biāo)記：NHS酯基團(tuán)與蛋白質(zhì)、抗體等生物分子中的伯胺基團(tuán)反應(yīng)，形成穩(wěn)定酰胺鍵，標(biāo)記效率高。

• 空間優(yōu)化：PEG4間隔臂減少生物素與目標(biāo)分子間的空間位阻，提升標(biāo)記靈活性。

• 生物相容性：PEG修飾增強試劑的水溶性和穩(wěn)定性，降低免疫原性，適用于生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用。

• 減少聚集：與僅含烴鏈間隔臂的試劑相比，Biotin-LC-PEG4-NHS ester標(biāo)記的抗體在溶液中存儲時聚集更少。

四、應(yīng)用領(lǐng)域

1. 蛋白質(zhì)與抗體標(biāo)記：

• 標(biāo)記抗體、酶等生物大分子，便于后續(xù)檢測（如ELISA、Western blotting）和純化（如親和層析）。

• 示例：標(biāo)記抗體后，通過鏈霉親和素磁珠實現(xiàn)高效純化。

2. 細(xì)胞標(biāo)記與成像：

• 標(biāo)記細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)，研究蛋白質(zhì)分布和功能。

• 示例：結(jié)合熒光標(biāo)記技術(shù)，實現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的動態(tài)追蹤。

3. 生物傳感器構(gòu)建：

• 利用生物素-親和素系統(tǒng)，構(gòu)建高靈敏度生物傳感器，檢測生物分子（如蛋白質(zhì)、核酸）。

4. 藥物遞送與靶向治療：

• 作為靶向載體，通過生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)實現(xiàn)藥物精準(zhǔn)遞送。

五、使用注意事項

• 反應(yīng)條件：在pH 7.0-9.0的緩沖液中反應(yīng)，保持生物分子天然活性。

• 儲存條件：需在-20℃下密封保存，避免光照和潮濕。

• 操作規(guī)范：

• 取用時保持干燥，避免反復(fù)凍融。

• 嚴(yán)格按推薦濃度使用，過量可能導(dǎo)致非特異性結(jié)合。

• 反應(yīng)后需通過透析或超濾去除未反應(yīng)試劑。

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