Biotin-C5-Mal，生物素-C5-馬來酰亞胺的介紹
2025-11-17
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Biotin-C5-Mal（生物素-C5-馬來酰亞胺）是一種結(jié)合生物素與馬來酰亞胺基團(tuán)的化學(xué)試劑，其核心特性與應(yīng)用如下：
一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與特性
組成
生物素（Biotin）：與親和素/鏈霉親和素高親和力結(jié)合（Kd≈10?1? M），用于靶向定位。
C5連接臂：含5個(gè)亞甲基的柔性鏈，減少空間位阻，避免生物素與馬來酰亞胺基團(tuán)相互干擾，提升標(biāo)記效率。
馬來酰亞胺（Maleimide）：與含巰基（-SH）的分子（如半胱氨酸殘基）發(fā)生特異性邁克爾加成反應(yīng)，形成穩(wěn)定共價(jià)鍵。
物理性質(zhì)
外觀：白色至類白色粉末。
溶解性：溶于大部分有機(jī)溶劑（如DMSO、DMF），在含少量助溶劑的水性緩沖液（pH 6.5-7.5）中部分溶解。
穩(wěn)定性：馬來酰亞胺基團(tuán)易水解，需避光、密封儲存于-20℃干燥環(huán)境，溶解后應(yīng)立即使用。
二、核心功能與應(yīng)用
特異性標(biāo)記含巰基生物分子
蛋白質(zhì)標(biāo)記：通過與半胱氨酸殘基反應(yīng)，將生物素引入目標(biāo)蛋白，便于后續(xù)分離、純化及檢測（如Western blot、ELISA）。
抗體修飾：標(biāo)記治療性抗體的游離巰基，減少生物素對抗原結(jié)合位點(diǎn)的空間遮擋，保持抗體活性，助力抗體藥物偶聯(lián)物（ADC）研發(fā)。
酶標(biāo)記：標(biāo)記含巰基的酶（如辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶），減少對酶活性中心的影響，提升酶聯(lián)免疫檢測靈敏度。
蛋白質(zhì)相互作用研究
標(biāo)記目標(biāo)蛋白后，利用C5連接臂的靈活性，使生物素更易與親和素結(jié)合，提高相互作用蛋白的捕獲效率，且不影響蛋白間結(jié)合作用。
細(xì)胞表面標(biāo)記與成像
標(biāo)記細(xì)胞表面標(biāo)志物（如受體、抗原），實(shí)現(xiàn)細(xì)胞分選、成像及功能分析（如流式細(xì)胞術(shù)、熒光顯微鏡觀察）。
藥物遞送系統(tǒng)
通過生物素與親和素的特異性結(jié)合，實(shí)現(xiàn)藥物的靶向輸送和控釋。
熒光探針與硫醇分析
馬來酰亞胺基團(tuán)具有熒光猝滅能力，可作為熒光探針特異性檢測硫醇分析物（如谷胱甘肽）。
三、特點(diǎn)與注意事項(xiàng)
特點(diǎn)
高特異性：僅與游離巰基反應(yīng)，減少非特異性結(jié)合。
高穩(wěn)定性：標(biāo)記產(chǎn)物共價(jià)鍵穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)條件下不易解離。
靈活性：C5連接臂降低空間位阻，提升標(biāo)記效率及后續(xù)親和結(jié)合效率。
注意事項(xiàng)
儲存條件：需嚴(yán)格避光、密封，儲存于-20℃干燥環(huán)境，避免頻繁解凍。
反應(yīng)條件：在pH 6.5-7.5的緩沖液中進(jìn)行反應(yīng)，避免含巰基的緩沖液（如Tris）。
操作速度：溶解后應(yīng)立即使用，防止馬來酰亞胺基團(tuán)水解失效。
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